AF430 OVA,Alexa Fluor430 Ovalbumin 应用于细胞生物学和免疫学研究

一、物化性质

保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融

英文名称: AF430 OVA,AF430 Ovalbumin,Alexa Fluor430 OVA,Alexa Fluor430 Ovalbumin,Ovalbumin,Alexa Fluor 430 labeled,Ovalbumin,AF430 labeled

中文名称: AF430标记鸡卵白蛋白

规格标准:该试剂的纯度通常达到95%以上,规格包括1mg、5mg、10mg等,也可按需包装。

生产信息:新研博美生物

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二、功能结构与组成

AF430标记鸡卵白蛋白(AF430 OVA)是一种将高性能荧光染料Alexa Fluor 430(AF430)共价偶联到鸡卵白蛋白(Ovalbumin, OVA)上形成的荧光示踪探针。它兼具OVA的免疫原性和AF430的高亮度荧光特性,广泛应用于细胞生物学和免疫学研究中。

化学本质:AF430 OVA是Alexa Fluor 430荧光染料与鸡卵白蛋白通过酰胺键(或其他稳定共价键)连接的复合物。

核心功能:作为模型抗原或示踪剂,用于研究细胞的吞噬作用(Phagocytosis)、抗原呈递过程以及蛋白质在细胞内的转运路径。

物理性质:通常为冻干粉末或溶液。OVA分子量约为45 kDa,AF430染料赋予其绿色荧光信号(激发/发射波长约为430/540 nm)。

结构特点

该标记物的结构设计体现了“载体+信号”的模块化特点:

蛋白载体(OVA):

来源与结构:OVA是鸡蛋清中的主要蛋白质,含有丰富的赖氨酸残基(氨基),为染料标记提供了丰富的反应位点。

特点:OVA是一种经典的T细胞依赖性抗原,具有明确的抗原表位,能够有效激活免疫系统,是研究免疫应答的理想模型。

荧光基团(AF430):

化学本质:AF430是一种磺化修饰的香豆素衍生物,属于Alexa Fluor系列染料。

光学特性:激发波长约430 nm(蓝紫光),发射波长约540 nm(绿色荧光)。它具有较大的斯托克斯位移(约105 nm),这意味着激发光和发射光重叠少,背景干扰低,信噪比高。

稳定性:相较于传统的绿色染料(如FITC),AF430具有更高的光稳定性和pH稳定性(pH 4-10),不易发生光漂白,适合长时间活细胞成像。

三、AF430 OVA 用于细胞成像与追踪 的原理、应用特点

工作原理

荧光标记原理:AF430 是一种磺酰基修饰的香豆素类荧光染料,其活性酯基团(如 NHS 酯)可与蛋白质表面的伯胺基团(主要是赖氨酸残基)发生酰胺化反应,形成稳定的共价键。OVA 作为标记底物,其表面富含伯胺,因此可通过此反应实现定点、高效的标记。

光学特性:AF430 的最大激发波长约为 430 nm,最大发射波长约为 542 nm(绿黄光范围)。它具有高亮度、高光稳定性、pH 不敏感性(在 pH 4–10 范围内稳定)以及大的斯托克斯位移(约 112 nm)。这些特性使其在荧光成像中能提供强且稳定的信号,并易于与其他荧光染料区分,适用于多色成像。

细胞成像与追踪机制:标记后的 AF430-OVA 复合物可通过多种方式引入细胞(如内吞、显微注射、电转等)。进入细胞后,在 405 nm 或 445 nm 激光(常见于共聚焦显微镜🔬)激发下,AF430 发出荧光。通过实时或定时拍摄,研究人员可可视化并量化 OVA 在细胞内的定位(如内吞体、溶酶体)、运动轨迹及代谢命运。

应用特点

高灵敏度与低背景:AF430 的荧光量子产率高,光稳定性强,能在长时间成像中抵抗光漂白,从而提供持续、清晰的信号,并有效降低背景噪声。

优异的生物相容性:OVA 是一种惰性、生物相容性好的模型蛋白,其标记过程通常不会显著改变其物理化学性质,且 AF430 染料本身亲水性强,对细胞毒性低,适合活细胞成像。

多通道兼容性:AF430 的激发与发射光谱与其他常用荧光染料(如 FITC、TRITC、Cy5)重叠较少,便于进行多色标记实验,同时观察多个靶点或过程。

适用于多种成像平台:AF430 可被标准的紫外/蓝光激光器(如 405 nm、445 nm)激发,兼容宽场、共聚焦、STED 超分辨显微镜🔬以及流式细胞仪等多种检测平台。

信号可定量:荧光强度与 AF430-OVA 的浓度在一定范围内呈线性关系,因此可用于定量分析细胞内蛋白的摄取量、分布密度及动态变化。

应用场景广泛:

内吞与胞内运输研究:追踪模型抗原(OVA)被抗原呈递细胞(如树突状细胞、巨噬细胞)摄取、加工及呈递的路径。

蛋白定位与周转:作为惰性报告分子,研究蛋白质在细胞器间的转运及降解动力学。

免疫学研究:作为荧光标记的抗原,用于可视化免疫细胞对抗原的捕获、处理及呈递过程。

药物递送研究:作为模型蛋白,偶联于纳米颗粒表面,用于评估递送系统的细胞内吞效率及胞内命

四、关联试剂

COOH-PEG16-COOH

NH2-PEG16-COOH

SH-PEG16-SH

CHO-PEG16-CHO

OPSS-PEG16-OPSS

Acrylate-PEG16-Acrylate

SVA-PEG-Adamantine

Acs-PEG3-NHBoc

AcS-PEG12-t-butyl ester

Azido-PEG5-iodoacetamide

Azido-PEG4-iodoacetamide

Methacrylate-PEG-Sodium Alginate

(本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理)

特别声明:[AF430 OVA,Alexa Fluor430 Ovalbumin 应用于细胞生物学和免疫学研究] 该文观点仅代表作者本人,今日霍州系信息发布平台,霍州网仅提供信息存储空间服务。

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