AF700 NHS Ester，Alexa Flour 700 NHS Ester在多通道荧光成像中的应用

常用名称：AF700 NHS Ester，Alexa Flour 700 NHS Ester（齐岳生物）

包装规格： 瓶装及mg或g级别

适用范围：仅限科研实验使用

一、分子概述

AF700 NHS Ester 是一种红近外荧光染料 Alexa Fluor 700 的 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯活化衍生物。该分子设计用于高效标记蛋白质、肽链或其他含氨基的生物分子，通过 NHS 酯与氨基发生共价结合，形成稳定的酰胺键，实现荧光标记。Alexa Fluor 700 荧光特性优异，激发波长约为696 nm，发射波长约为719 nm，在红近外光谱区发光，光稳定性高、量子产率较高，非常适合多通道成像和体内成像实验。

AF700 NHS Ester 可用于蛋白质、抗体、纳米颗粒及其他功能分子标记，实现可视化检测、信号放大或多通道荧光成像，为细胞生物学、分子成像及体内追踪实验提供可靠工具。

二、物理化学性质

AF700 NHS Ester 为小分子化合物，通常提供为干粉形式，易溶于极性有机溶剂，如 DMSO 或 DMF，水溶性有限。溶解后可在缓冲液中进行蛋白质偶联反应。NHS 酯对水分解敏感，因此溶液应现用现配，避免长时间在水中保存。

该分子在常温下稳定，但需避光保存，防止荧光衰减或染料降解。标记反应通常在弱碱性条件（pH 7.5–8.5）下进行，以保证 NHS 酯活性，同时保持蛋白质或目标分子的结构稳定。

三、标记原理与反应机制

AF700 NHS Ester 通过其 NHS 酯活性末端与蛋白质氨基反应，形成稳定酰胺键，实现共价偶联。该反应温和，对蛋白质功能影响较小。由于 Alexa Fluor 700 的红近外荧光特性，标记后分子可在 690–720 nm 波段进行激发与发射，非常适合多通道荧光实验或体内近红外成像，可有效减少自发荧光干扰，提高信噪比。

偶联反应通常在缓冲体系中进行，避免使用含氨基的缓冲液（如 Tris），以免干扰 NHS 酯反应。反应温度一般为室温或略低温，反应时间根据蛋白浓度和目标标记比例进行优化。

AF700 NHS Ester，Alexa Flour 700 NHS Ester

四、应用方向

1. 抗体及蛋白质标记
2. AF700 NHS Ester 可用于抗体和蛋白质标记，结合红近外荧光信号，用于流式细胞分析、免疫组化及蛋白定位研究。
3. 多通道荧光成像
4. 红近外光谱区荧光可与 FITC、PE、Cy5 等绿色或橙色荧光标记组合，实现多通道细胞或组织成像，便于同时检测多种目标。
5. 体内成像与分子追踪
6. Alexa Fluor 700 的近红外特性降低了组织自发荧光干扰，可用于活体分子追踪、药物载体追踪及体内成像实验。
7. 纳米颗粒及小分子标记
8. 可用于标记纳米颗粒、脂质体或小分子探针，实现功能化和可视化分析。

五、使用注意事项

1. 储存与稳定性
2. AF700 NHS Ester 应储存在低温（–20°C）、避光、干燥条件下。溶解液应现用现配，避免 NHS 酯水解导致活性下降。
3. 缓冲体系选择
4. 偶联反应应在弱碱性缓冲液（如 PBS pH 7.5–8.5）中进行，避免含氨基或巯基的缓冲液干扰偶联。
5. 蛋白质活性保护
6. 控制反应温度和时间，避免高温或长时间反应，以保持蛋白质或抗体活性。
7. 纯化与分析
8. 偶联完成后，应通过透析、凝胶过滤或层析去除未反应的染料，保证标记蛋白或分子的纯度与稳定性。

六、总结

AF700 NHS Ester 是一种高效、稳定的红近外荧光标记试剂，通过 NHS 酯活性末端实现蛋白质及其他氨基化分子标记。其近红外荧光特性、光稳定性和温和偶联条件，使其在流式细胞分析、多通道成像、体内分子追踪及纳米材料功能化标记中具有广泛应用。合理控制储存、溶解及偶联条件，可发挥其最佳性能，为科研实验提供可靠的荧光标记方案。

物理形态： 可根据需求提供固体、粉末或溶液形式

储存条件： 建议冷藏保存，以维持产品的稳定性和活性

推荐试剂： 大环配体化合物，NOTA-NFB 2193061-18-4，Me-Diazirine-C5-NH2 (4E)-TCO-OH CAS:85081-69-2 (4E)-反式环辛烯-羟基 1366302-52-4，PSMA11 cy5-花生凝集素，CY5 PNA Annexin V Pacific Blue 1802908-02-6，甲基四嗪 PEG4 马来酰亚胺 1628029-01-5，UV-Tracer Biotin NHS ester BDP TR NHS Ester（CAS：150152-65-1） 1023889-20-4，(S)-DOTAGA-(COOt-Bu)4，(S)-DOTAGA-四叔丁酯 AF350 Hydrazidy Sulfo-Cyanine3.5 cRGD Sulfo-Cy3.5 cRGD CAS号92659-90-0 2-「(叠氮基乙酰基)氨基」-2-脱氧-D-葡萄糖 PMB-DCL，PET探针

备注： 信息整理 / 编辑：kx