保存条件：避光、-20°C储存，避免反复冻融
溶解性：溶于水以及部分有机溶液。
英文名称：AF660 C2 Maleimide
中文名称：AF633 C5 马来酰亚胺
激发波长 (nm)：632
发射波长(nm)：650
规格：5mg，10mg，25mg
纯度：95%+
核心结构：
AF660 C2 Maleimide 由 Alexa Fluor 660 荧光团 和 马来酰亚胺活性基团 通过 C2连接臂（两碳链） 构成 。
C2连接臂的作用：
提供空间柔性，减少对标记分子构象的干扰，提升标记效率 。
增强染料的水溶性，适用于活细胞标记及体内成像 。
光学特性：
激发波长（Ex） ：632 nm 。
发射波长（Em） ：650 nm（近红外区）。
优势：
近红外发射降低生物样本自发荧光背景，提高信噪比 。
高光稳定性，适合长时间成像或多次扫描 。
在生理pH范围内稳定（pH 6.5–7.5）。
反应特异性：
马来酰亚胺基团通过 迈克尔加成反应与生物分子的 巯基（-SH）结合，形成稳定的硫醚键。
反应条件要求：
pH 6.5–7.5：碱性环境（pH>8）会导致马来酰亚胺水解失效。
温度：室温或4°C反应，避免高温副反应。
时间：30分钟–2小时完成。
三、常见问题与解决方案（一）标记效率低或副产物增多
问题根源：
pH不当：pH >8.5时马来酰亚胺基团易水解为无活性的马来酰胺酸；pH <6.5时反应速率过低。
硫醇状态异常：靶蛋白的二硫键未充分还原，或游离巯基被氧化。
杂质干扰：缓冲液中含还原剂（如DTT）或杂蛋白竞争结合。
解决方案：
严格控制pH 6.5–7.5（最佳反应条件）。
标记前预处理：用TCEP/DTT还原靶蛋白二硫键，再用脱盐柱去除多余还原剂。
优化染料:蛋白摩尔比：避免过量染料导致副反应。
（二）溶解度不足或沉淀析出
问题根源：
溶剂选择错误（如直接用水溶解），或储备液浓度过高。
反复冻融导致染料降解。
解决方案：
使用无水DMSO配制储备液，分装避光保存（-20℃以下）。
水溶性优化：改用DMSO/DMF混合溶剂，超声助溶。
避免反复冻融：分装后单次使用。
（三）荧光信号弱或淬灭
问题根源：
光照导致光漂白。
储存不当（受潮、高温）或纯化不彻底（未结合染料干扰检测）。
解决方案：
全程避光操作，标记后立即纯化。
验证储备液新鲜度：现用现配，避免长期储存。
四、关联试剂Biotin-PEG7-amido-Mal
Cyanine7.5 azide，Cy7.5-N3
1628790-36-2，1628897-78-8
生物素-七聚乙二醇-酰胺-马来酰亚胺
AF 647 LEL；AF 647标记的番茄凝集素
ATTO 425 马来酰亚胺；892156-52-4
Biotin-PEG2-OH，生物素-二聚乙二醇-羟基
Alexa Fluor 660 Wheat Germ Agglutinin
AF 647 Maleimide，Alexa Fluor 647 Mal
Sulfo-Cyanine7.5 amine，Sulfo-Cy7.5 NH2
sulfo-Cyanine7.5 maleimide，sulfo-Cy7.5-mal
Cyclooctyne-O-NHS ester，Cyclooctyne-O-琥珀酰亚胺酯
5-Maleimido-pentanoic NHS Ester，Mal-C2-NHS Ester
（本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理）
