Tide Quencher 2WS酸的反应条件

Tide Quencher 2WS酸的反应条件

Tide Quencher 2WS酸是一种功能强大的非荧光型淬灭剂,具有良好的水溶性和宽吸收波段,常用于荧光免疫分析(FIA)、荧光原位杂交(FISH)、分子成像以及生物标记等领域。作为一种高效暗淬灭剂,TQ2WS酸能够通过荧光共振能量转移(FRET)机制有效淬灭多种可见光到近红外波段的荧光染料,极大降低背景信号,提高检测灵敏度和准确性。

一、化学性质与水溶性

TQ2WS酸分子结构中包含多个磺酸基团(–SO3H),赋予其极佳的水溶性和生物相容性,能够在生物缓冲液及体液环境中保持稳定。其最大吸收波长位于可见光至近红外区域,适合与多种荧光染料形成有效的淬灭对。

二、典型反应条件

TQ2WS酸的活性羧基使其能够与含有胺基的生物大分子(如抗体、蛋白质、多肽)通过酰胺键共价结合,构建功能化的荧光探针或免疫试剂。其典型反应步骤和条件如下:

活化步骤

将TQ2WS酸溶于无水有机溶剂(如DMF或DMSO)中。

添加N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和碳二亚胺类活化剂(如EDC或DCC),在室温下搅拌反应1-2小时,生成TQ2WS-NHS活性酯。

该反应需在无水条件下进行,以避免活性酯水解。

偶联步骤

将活化的TQ2WS-NHS酯溶液缓慢加入含有目标蛋白或抗体的缓冲液(通常为pH 7.2–8.5的PBS或碳酸盐缓冲液)。

反应体系温和(4–25℃),孵育数小时至过夜,以实现胺基与活性酯的高效偶联。

反应过程中应避免剧烈搅拌和强光照射,防止蛋白质变性和荧光分子光漂白。

纯化和去除游离试剂

反应结束后,利用透析、凝胶过滤柱或超滤等方法去除未反应的淬灭剂和小分子杂质。

纯化后的标记物适合用于后续的免疫分析和成像实验。

产品名称:Tide Quencher 2WS酸

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:齐岳生物

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